Extraccion de ADN en celulas de platano

TEORIA

¿Que es el ADN?

Es una proteina compleja que se encuentra en el núcleo de las células y constituye el principal constituyente del material genético de los seres vivos.

OBJETIVO DE LA PRACTICA

Extraer ADN de las células de un plátano y, después observarlo

MATERIALES  
 -Platano
-Cristalizador
-Tenedor
- Cuchara
-Fairy
-Cucharada de sal
-Agua destilada
-Papel de filtro
-Alcohol frío de 95º
 -Vaso de precipitado

PROCEDIMIENTO    

1.Usamos la mitad de un plátano, lo cortamos y  depositamos sobre un plato

2. Aplastamos el plátano con ayuda de un tenedor y agua destilada.

3.En un vaso de precipitado mezclamos, con la cuchara, fairy y dos pizcas de sal. Evitamos que se forme espuma.

4. A la solución  anterior agregamos una cucharada del plátano anteriormente aplastado y se mezcla durante cinco minutos volviendo a evitar que se forme la espuma.

 
5. Filtramos la mezcla obtenida a través de un colador y una gasa hasta obtener unos cinco milílitos de solución.

6. Colocamos la solución obtenida en un tubo de ensayo ocupando su cuarta parte, después introduciremos en el tubo de ensayo el alcohol hasta ocupar la tercera parte del tubo.
(se puede observar una sustancia blanca (AND))

7. Con ayuda de unas pinzas extraeremos del tubo la parte blanquecina, es decir, el ADN

Separación de pigmentos vegetales por cromatografía

Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado
clorofila. Sin embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es
una mezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de
clorofila (clorofila a y clorofila b), por β caroteno y por xantofila.
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad, lo
cual permite su separación cuando una solución de la misma asciende por
capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las más
solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente
al disolvente a medida que éste va ascendiendo. De esta forma, al cabo
de cierto tiempo, a lo largo del papel de filtro se irán situando los distintos
pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto más desplazadas cuanto
más solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto más anchas
cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla.

Materiales:

- Mortero.
- Papel de filtro.
- Carbonato de calcio
- Vaso de precipitados

- Embudo de vidrio y embudo de papel.
- Alcohol de 96º
- Hojas de espinacas

Procedimiento:

1. Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas (quitando las nerviaciones
más gruesas) junto con 50 o 60 cm3 de alcohol de 90º y una cucharadita de
carbonato de calcio. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa.

 

2. Filtrar, recogiendo el liquido en un vaso de precipitado. Se obtiene así una solución, en alcohol, de pigmentos.

Separación de pigmentos

 

4. Se coloca un papel de filtro doblado en ángulo sobre la solución y se deja en reposo el tiempo necesario.

 

5. Obtenemos, finalmente, la separacion de pigmentos en el papel. 

 

 

Obtención de jabón casero

MATERIALES

• Cristalizador
• Palo removedor de madera.
• Moldes o cajones de madera.
• Papel basto de embalar.
• 
  

  INGREDIENTES

  • 300 g de agua.
  • 50 g de sosa cáustica.
  • 300 g de aceite de frituras.

    ELABORACIÓN:

    1. Se pesa la sosa caustica y se pone en el cristalizador
    2.  Se añade 300 g de agua al cristalizador y removemos hasta disolver totalmente la sosa en el agua y vamos añadiendo poco a poco y de forma continuada los 300 g de aceite al tiempo que se remueve la mezcla para homogeneizarla.
    3. Poco a poco esta ira tomando un color amarillento cremoso, momento en que se debe seguir removiendo procurando no cambiar el sentido de giro ni el ritmo, ya que podria cortarse.
    4. La elaboración llegará a su fin cuando el jabón tome un aspecto mas viscoso y cremoso, aproximadamente a los 30-40 minutos desde el comienzo de la operación. Llegado ese momento se dejará reposar durante varios día.
    Una vez seco, se cortará en porciones que se sacarán del cajón y se dejarán reposar en un lugar seco durante 8 o 10 dias.
    
    Saponificación:
    1. La saponificación es un proceso químico por el cual un cuerpo graso, unido a un álcali y agua, da como resultado jabón y glicerina.
       grasa + sosa cáustica → jabón + glicerina
       
       
       

       Fotos de la práctica:

       

       
       

       

determinación del grupo sanguíneo

Objetivo de la practica:

- Que cada alumno y alumna del grupo conozca su grupo sanguíneo.

Materiales:

- Suero anti-A

-  Suero anti-B

-Portaobjetos

- Aguja esterilizada

- Agua oxigenada 

- Algodón

- Una gota de sangre

- Microscopio 

Fundamento:

Los glóbulos rojos o hematíes son células sanguíneas, por lo tanto todos los tenemos. Sin embargo, en la membrana de los glóbulos rojos pueden existir unas proteinas especiales: son las glucoproteínas A y B. Así, un glóbulo rojo puede tener proteína A, proteína B, tener ambas o no tener ninguna. De manera que un individuo tendrá grupo sanguíneo A si sus glóbulos rojos tienen la glucoproteína A en su membrana, siguiendo el mismo criterio para el resto de los grupos (si no existe proteína, entonces será de grupo sanguineo O). Estas proteínas corresponderían a lo que denominan antígenos.
Ahora bien, en el plasma sanguineo tenemos anticuerpos. Evidentemente, un individuo del grupo A no podrá tener anticuerpos anti-A, pues ésto no sería viable (la sangre coagularía).
Así :

• los individuos A tendrán anticuerpos anti-B
• los individuos B tendrán anticuerpos anti-A
• los individuos AB no tendrán anticuerpos de este tipo
• los individuos O tienen los dos tipos de anticuerpos.

Grupo sanguineo	A	B	AB	O
Glóbulos rojos
En la membrana	Antígeno A	Antígeno B	Antígenos A y B	No antígenos
En el plasma	Anti-B	Anti-A	No anticuerpos	Anti-A y Anti-B

Técnica de preparación:

- Pinchar la yema del dedo, con una aguja previamente desinfentada con alcohol o agua oxigenada.

-Colocar en un portaobjetos tres gotas de sangre cubrir una gota con suero anti-A, otra de anti-B, y otra de anti-A y anti-B, cada una en su casilla correspondiente, como se indica en la fotografía:

- Observar los resultados. El grupo sanguíneo del individuo corresponderá con el de la casilla en la que la sangre haya coagulado. 

Mitosis en celula vegetal

Teoría

-Reproducción vegetativa: Proceso que desarrolla nuevas células a partir de una porcion de ellas diferentes a la semilla

-Bulbos: Tallos subterráneos cubiertos de varias capas de ojas modificadas. 

Objetivo de la practica

El obejetivo de la practica es observar he interpretar figuras de distintas frases de la mitosis vegetales.

Materiales

-Microscopio

-Pinzas finas

-Bisturi

-Tiras de papel de filtro

-Orcedina acetica clohidrica

- Bulbo de ajo

-Pinzas de madera

-Mechero
-Bandeja
-Papel de cocina
-Vidrio de reloj

Fundamento

-El proceso de reproduccion muscular conocido por el nombre de mitosis, puede ser estudiado eligiendo un material constituido por celulas que se hallen en continua division.

-Esta condicion la reunen los meristemos terminales o primarios, que se encuentran en la raiz de los bulbos del ajo.

-Un bulbo de ajo   cuya base se mantenga en contacto con el agua durante 4 o 5 días, nos proporciona abundante cantidad de raicillas jóvenes, muy apropiada para la obtención de muestras destinadas a observar figuras de la mitosis.

Técnica de preparación 
-Cinco dias antes de realizar la practica colocaremos un ajo en una bandeja y lo cubriremos con papel mojado.

-Cortaremos con un bisturí los cinco últimos milímetros de la raíz depositándolas después en un vidrio de reloj.

-Cubrir la muestra realizada con orceína A acética clohidrica.

-Dejaremos actuar la orceina durante cuatro minutos.

-Cogeremos el vidrio de reloj por los bordes con la ayuda de una pinza de madera y lo calentaremos con la llama del mechero, evitando la ebullicion, pararemos de calentar cuando se comiencen a emitir tenues vapores.

-Tomamos con cuidado la raiz y la colocamos sobre un portaobjetos.

-Lavamos con un poco de agua la muestra

-Cubrimos la muestra con orceina B y volvemos a calentar

-Colocamos el cubre objetos y encima una almohadilla hecha con papel de filtro sobre la que vamos a ejercer presión cada vez de forma mas progresiva para conseguir aplastar la muestra.

Observación al microscopio
-La muestra presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el microscopio


-Se observan células en distinta fase de división celular.
 

-Los cromosomas impregnados por la orceina se veran en color morado

Observación de tejidos vegetales y animales

Muchos epitelios, tanto animales como vegetales, constituyen un excelente material para observar células al microscopio óptico. Las células epiteliales se mantienen unidas unas a otras formando capas continuas, lo que facilita la extracción de películas de células, fácilmente extensibles sobre un porta y que pueden teñirse directamente con azul de metileno.

Tejidos animales:

Tejidos epiteliales: Conjunto de células estrechamente unidas que o bien tapizan las superficies corporales (tanto internas como externas) o se agrupan para formar glándulas.

Tejidos conectivos o conjuntivos: Son un variado tipo de tejidos.Los tejidos conectivos se originan a partir de las células mesenquimáticas embrionarias y forman la mayor parte del organismo, realizando funciones tan variadas como nutrición, reserva, etc. La clasificación de los tejidos conectivos puede variar según los diferentes autores.

Tejido muscular: Formado por células que pueden contraerse, lo que permite el movimiento de los animales o de partes de su cuerpo.

Tejido nervioso: Está constituido por células especializadas en procesar información. La reciben del medio interno o externo, la integran y producen una respuesta que envían a otras células, sobre todo a las células musculares.

Observación de tejido muscular estriado:

MATERIAL:

- Microscopio
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
- Frasco lavador
- Aguja enmangada
- Pinzas
- Azul de metileno
- Trozo de carne
- Cubeta de tinción

PROCEDIMIENTO:

     1. Con la aguja enmangada hacemos surcos paralelos a las fibras. Se separan paquetes musculares. Cogemos algunos y con las pinzas los ponemos en el porta.
     2. Sobre la muestra vertemos unas gotas de alcohol y esperamos a que este se evapore.
     3. Se tiñe (durante un minuto) la muestra con azul de metileno. Lavamos con agua, sujetando la fibra.
     4. Depositamos una gota de agua sobre el tejido y el cubre.
     5. Observamos la muestra en el microscopio y vemos sus partes.

Tejidos vegetales:

Tejidos protectores: son aquellos tejidos encargados de proteger a la planta, formando una capa externa en ella para así resguardarla de los agentes externos; está conformada por el tejido epidérmico o epidermis y el tejido suberoso o súber.

Tejidos conductores: estos tejidos se forman a partir de diferentes tipos de células y de ahí se les denomina como los tejidos más complejos, dado a que en su mayoría derivan de las células meristemáticos; existen dos tipos de tejidos conductores que son el xilema y el floema, los cuales constituyen el sistema vascular o conductor de los vegetales.

Tejidos de crecimiento: estos también llamados meristemos se constituyen por células jóvenes que se dividen continuamente por medio de una mitosis; las células de estos originan las células que forman la planta. Los tejidos de crecimiento poseen un núcleo grande con abundante citoplasma.

Tejidos parenquimáticos: se encargan de nutrir a la planta, localizado en todos los vegetales, se ocupan de llenar aquellos espacios libres que otros órganos y tejidos dejan; existen varios tipos, donde uno de ellos es el responsable de realizar la fotosíntesis.

Tejidos de sostén: estos se constituyen por células cuyas paredes celulares son gruesas para aportar una resistencia mecánica grande; comparten la misma función pero se diferencian por su estructura y la textura de las paredes celulares que poseen, además por la localización de cada uno dentro del vegetal.

Tejidos secretores: constituidos por estructuras diversas, con la única característica en común es la de almacenar y segregar sustancias a las cavidades externas e internas del vegetal; existen varios tipos de estos tejidos de acuerdo a su localización.

Tejidos meristemáticos: son los responsables del crecimiento vegetal, en un sentido longitudinal y diametral; las células en estos tejidos poseen una doble capacidad de diferenciación y de multiplicación.


Observación de epidermis en una hoja de lirio:

MATERIALES:

- Microscopio
- Frasco lavador
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Aguja enmangada
- Pinzas
- Cubeta de tinción
- Azul de metileno
- Hoja de lirio
- Bisturí
- Cuentagotas

PROCEDIMIENTO:

     1. Haz una suave incisión (perpendicular al envés de la hoja) con el bisturí. Levanta uno de los bordes con las pinzas para obtener una lámina muy fina, translúcida como el celofán. Procura no arrastrar el tejido de color verde de debajo.
     2. Coloca el fragmento (de al menos 0,5 cm de lado) sobre el portaobjetos. Vierte unas gotas de azul de metileno y déjalo teñir durante 2-3 minutos.
     3. Echa unas gotas de agua sobre la muestra para retirar el azul que sobra. Pon una gota de agua y coloca sobre ella el cubreobjetos.

FOTOS:

Médula de oveja

Pulmón de mamífero

Trompa uterina

Lengua de mamífero

 

Tejido muscular estriado

Observación de la mucosa bucal.

MATERIAL:

- Microscopio, portas y cubres
-Mechero de alcohol

-Palillo de dientes 

- Cuentagotas 

- Cubeta de tinción

-Azul de metileno 

- Frasco lavador con agua

-Pinzas de madera

PROCEDIMIENTO:

1-. Raspar suavemente el carrillo interno de la boca con un palillo de dietes, después depositar la sustancia blanquecina en un porta objetos con una gota de agua y extiendelo bien con ayuda del bastoncillo o palillo.

2-. Se cubre toda la muestra con azul de metileno durante 2-3 minutos, pasados los cuales lavamos el porta abundantemente, colocándolo inclinado y echando agua suavemente con el cuentagotas o el frasco lavador para que sea arrastrado el colorante sobrante.

3.Calentar suabemente la muestra en el portaobjetos con ayuda de las pinzas del madera hasta que el agua se evapore.

4-. Después de evaporar el agua por completo, se cubre la muestra con azul de metileno durante 2-3 minutos reposando. Pasados los cuales lavamos el porta abundantemente, colocándolo inclinado y echando agua suavemente con el cuentagotas o el frasco lavador para que sea arrastrado el colorante sobrante. Esto hay que hacerlo hasta que no salga color.

5-. Observar la preparación al microscopio a pocos aumentos. Escoger para la observación, moviendo el porta sobre la platina, la zona mejor teñida. Después, ir colocando aumentos mayores.

Célula de la mucosa encontrada en el interior de la mejilla 

Fotos de la práctica:

Observación desde el microscopio de la mucosa bucal

Observacion del frotis sanguineo

Teoria:

Un frotis o extendido de sangre es un mecanismo científico que consiste en el extendido de una gota de sangre sobre la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente al microscopio.

Los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:

Materiales:

-Microscopio 

-Lanceta esteril

-Algodon

-Alcohol

-Portaobjetos

-Cubreobjetos

Proceso:

- Masajear la yema del dedo y limpiarla con un algodón empapado el alcohol.

- Mantener presionado el dedo y realizar una punción suavemente con la lanceta.

1. Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (preferentemente nuevos).
2. La gota de sangre usada para la preparación del frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia del tamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.
3. La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".

Extensión de portaobjetos

1.  Para llevar a cabo las extensiones en portaobjeto se coloca una gota de sangre de 3 a 4 mm de diámetro, a unos 2 o 3 cm de uno de los extremos del portaobjetos, este se coloca en una superficie plana y lisa. Con el borde de otro portaobjeto, con el que se toca la gota de sangre, la cual se desliza por capilaridad a todo lo largo de el canto de dicho portaobjeto y con un movimiento rápido y uniforme, en un ángulo de 45 grados se desliza el portaobjetos dejando una capa de sangre en la superficie del otro. El espesor del extendido debe ser delgado.
   
   
   
   
   Foto de la práctica:
   
   

OBSERVACIÓN DE CÉLULAS VEGETALES

Célula vegetal: la célula es un sistema muy complejo el cual es el centro de intercambios intensos en energía. Como todos seres vivos, la célula se nutre, crece, se multiplica y muere. Las células de las plantas eucarióticas (tienen un núcleo delimitado por una membrana). Las células vegetales presentan:

     - Pared celular: rígida que evita cambios de forma y posición.     - Plastidios: estructuras rodeadas por una membrana, que sintetizan y almacenan alimentos     - Vacuolas: tienen la función de transportar y almacenar nutrientes, agua y productos de desecho.     - Membrana nuclear, que establece una barrera entre la cromatina (material genético) y el citoplasma.     - Mitocondrias: convierten los nutrientes en energía que utiliza la planta.     - Cloroplastos: unos orgánulos capaces de sintetizar azúcares a partir de dióxido de carbono, agua y luz solar.     - Aparato de Golgi: es un orgánulo cuya función es completar la fabricación de algunas proteínas.     - Ribosomas: están encargados de sintetizar proteínas a partir de la información genética     - Retículo Endoplasmático: es una red interconectada que forma tubos aplanados y sáculos comunicados entre sí, que intervienen en funciones relacionadas con la síntesis proteica, metabolismo de lípidos y algunos esteroides, así como el transporte intracelular

PRÁCTICA:

Materiales:

- Cubreobjetos 

- Portaobjetos 

- Las muestras 

- Cubeta de tinción 

- Azul de metileno 

- Espátula 

- Microscopio 

- Gotero 

- Frascos pequeños con agua 

- Bisturí 

- Bulbos de cebolla 

Procedimiento:

 1. Separamos una de las capas internas de la cebolla, desprendiendo con la pinza la membranita adherida por la cara inferior cóncava de una de sus capas, llevándola al portaobjetos para humedecerla con un poco de agua destilada y evitando que se enrosque.

 2. Colocamos la muestra bien extendida y añadimos el azul de metileno hasta que este totalmente cubierta. Después, limpiamos la muestra echándole unas gotas de agua (con el gotero) y la cubrimos con el cubreobjetos.

 3. Lo ponemos en el microscopio, observando las células vegetales y su forma hexaédrica (en celdas) y alargadas.