Separación de pigmentos vegetales por cromatografía

Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado
clorofila. Sin embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es
una mezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de
clorofila (clorofila a y clorofila b), por β caroteno y por xantofila.
Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad, lo
cual permite su separación cuando una solución de la misma asciende por
capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las más
solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente
al disolvente a medida que éste va ascendiendo. De esta forma, al cabo
de cierto tiempo, a lo largo del papel de filtro se irán situando los distintos
pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto más desplazadas cuanto
más solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto más anchas
cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla.

Materiales:

- Mortero.
- Papel de filtro.
- Carbonato de calcio
- Vaso de precipitados

- Embudo de vidrio y embudo de papel.
- Alcohol de 96º
- Hojas de espinacas

Procedimiento:

1. Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas (quitando las nerviaciones
más gruesas) junto con 50 o 60 cm3 de alcohol de 90º y una cucharadita de
carbonato de calcio. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa.

 

2. Filtrar, recogiendo el liquido en un vaso de precipitado. Se obtiene así una solución, en alcohol, de pigmentos.

Separación de pigmentos

 

4. Se coloca un papel de filtro doblado en ángulo sobre la solución y se deja en reposo el tiempo necesario.

 

5. Obtenemos, finalmente, la separacion de pigmentos en el papel.